目的：探讨胆碱能受体激动剂GTS-21体外抗炎效果及其分子作用机制，评价其是否具有治疗类风湿关节炎的潜能。
方法：以小鼠单核/巨噬细胞细胞系RAW264.7为研究对象，采用不同浓度GTS-21(0，5，10，20和100μM)作用于RAW264.7，以细胞增殖-毒性检测试剂盒（Cell Counting Kit-8，CCK-8）检测药物细胞毒性。在不同浓度GTS-21作用下，以100ng/ml LPS刺激RAW264.7，分别收集细胞上清和基质，以酶连免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assays, ELISA)检测炎性因子表达水平（IL-1β, IL-6和TNF-α），以Western blot (WB)方法检测炎症信号通路相关蛋白磷酸化NF-κB和磷酸化AKT的表达水平。另外，通过激光扫描共聚焦荧光显微镜法（Laser Scanning Confocal Microscope, LSCM）检测GTS-21对于磷酸化NF-κB入核情况的影响。
结果：CCK-8实验结果显示不同浓度GTS-21对RAW264.7细胞无明显增殖毒性。ELISA结果显示GTS-21处理后的RAW264.7中，由LPS引起的细胞炎性因子（IL-1β, IL-6和TNF-α）水平大大降低，且IL-6的降低与GTS-21作用浓度之间呈现剂量依赖性。WB结果显示100μM 的GTS-21可以降低NF-κB和AKT的磷酸化水平。此外，LSCM结果显示100μM 的GTS-21可以很好的阻止磷酸化NF-κB转移入核。
结论：在小鼠单核/巨噬细胞细胞系RAW264.7中观察到GTS-21呈现出很好的抗炎效果，其可通过调控AKT/NF-κB通路来抑制LPS诱发的炎症反应，因此具有一定的类风湿关节炎治疗潜能。
